称取20g样品,精确至0.1g,加入10ml丙酮,置于捣碎机中,捣碎过滤.
准确吸取20ml20g/l硫酸钠溶液,1ml0正己烷,5ml滤液,于离心管中,混匀离心.取上清液通过盛有无水硫酸纳的漏斗,再于离心管中加入10ml正己烷,混匀离心,将上清液同样过滤,用2ml正己烷清洗漏斗内残渣,将合并的滤液于旋转蒸发器上浓缩至干,再以正己烷2ml定容供气相色谱测定.
4仪器条件
柱温:270摄氏度,进样口温度:280摄氏度,检测器温度:300摄氏度.
尾吹气:30ml/min,进样方式:不分流.
出峰顺序:氯氰菊酯,氰戊菊酯.
3,六六六的检测方法:
气相色谱法原理:样品中六六六,滴滴涕经提取,净化后用气相色谱法测定,与标准比较定量.电子捕获检测器对于负电极强的化合物具有较高的灵敏度,利用这一特点,可分别测出微量的六六六和滴滴涕.不同异构体和代谢物可同时分别测定.
1.试剂:使用的试剂一般系分析纯,2.有机溶剂需经重蒸馏.
2.1丙酮,正己烷,石油醚(沸程30——60C)苯,硫酸,无水硫酸钠,硫酸钠溶液(20g/l)
2.2六六六滴滴涕标准液:准确称取各样品10.0mg,溶于苯,分别移入100ml容量瓶中,加苯至刻度,混匀.每毫升含农药100.0ug,作为储备液储备液存于冰箱中.
2.3六六六滴滴涕标准使用液:将上述标准储备液以己烷稀释至适宜浓度,一般为0.01ug/ml.
3仪器:
组织捣碎机,旋转蒸发器,
4分析步骤
4.1提取
4.1.1称取具有代表性的样品(适用于生的及烹调加工过的蔬菜,水果或谷类,豆类,肉类,蛋类)约200,加适量水,于捣碎机中捣碎,混匀.称取匀浆2.00——5.00g,于50ml具塞三角瓶中,加10——15ml丙酮,在振荡机振荡30min,过滤于100ml分液漏斗中,残渣用丙酮洗涤四次,每次4ml,用少许丙酮洗涤漏斗和滤纸,合并滤液30——40ml,加石油醚20ml,摇动数次,放气.振摇1min,加20ml硫酸钠溶液(20g/l)振摇1min,静置分层,弃去下层水溶液.用滤纸擦干分液漏斗颈内外的水,然后将石油醚液缓缓放出,经盛有约10g无水硫酸纳的漏斗,漏入50ml三角瓶中.再以少量的石油醚液分三次洗涤原分液漏斗,滤纸和漏斗,洗液并入滤液中,将石油醚浓缩,移入10ml具塞试管中,定容至5.0ml或10.0ml.
4.1.2净化
5.0ml提取液加0.50ml浓硫酸,盖上试管塞.振荡数次后,打开塞子放气,然后振荡0.5min,于1600r/min,离心15min,上层清液,供气相色谱分析用.
4..2测定
4.2.1气相色谱参考条件
4.2.1.1色谱柱:内径3~4mm,长1.2~2m的玻璃柱,内装涂以OV—17{15g/l}和QF—1{20g/l}的混合固定液的80~100目硅藻土.
4.2.1.2__Ni_电子捕获检测器:汽化室温度:215摄氏度;色谱柱温度:195摄氏度;检测器温度:225摄氏度;载气{氮气}流速:90ml/min;纸速:0.5cm/min.
4.2.2测量与计算
电子捕获检测器的线性范围窄,为了便于定量,选择样品进样量使之适合个组分的线性范围.根据样品中六六六,滴滴涕存在形式,相应的制备各组分的标准曲线,从而计算出样品中的含量.
六六六,滴滴涕及异构体或代谢物含量按式{1}计算.
X1=A1*100/m1*(V1/V2)*100
X1-样品中六六六,滴滴涕及其异构体或代谢物的单一含量,mg/kg;
A1-被测定用样液中六六六或滴滴涕及其异构体或代谢物的单一含量,ng;
V1-样品净化液体积,ml;
V2-样液进样体积,ul;
M1-样品质量,g.
结果的表述:报告平行测定的算术平均值的两位有效数.
4,氢化物原子荧光光谱法
1.原理:
热消化后,在酸性介质中,试样中的铅与硼氢化钠(NaBH4)或硼氢化钾(KBH4)反应生成挥发性铅的氢化物(PbH4).以氩气为载气,将氢化物导入电热石英原子化器中原子化,在特制铅空心阴极灯照射下,基态铅原子被激发至高能态;在去活化回到基态时,发射出特征波长的荧光,其荧光强度与铅含量成正比,根据标准系列进行定量.
2.试剂
硝酸+高氯酸(4+1)混合酸:分别量取硝酸400ML,高氯酸100ML,混匀.
盐酸溶液(1+1):量取250ML盐酸倒入250ML水中,混匀.
草酸溶液(10g/l):称取1.0g草酸,加入溶解至100ml,混匀.
铁氰化钾[K3Fe(CN)6溶液(100g/l):称取10.0g铁氰化钾,加水溶解并稀释至100ml,混匀.
氢氧化纳溶液(2g/l):称取2.0g氢氧化纳,溶于1L水中,混匀.
硼氢化钠[NaBH4]溶液(10g/l):称取5.0g硼氢化钠溶于500mL氢氧化纳溶液(2g/L)中,混匀,用前现配.
铅标准储备液1.0mg/mL)
铅标准应用液(1.0ug/Ml):精确吸取铅标准储备液(1.0mg/mL),逐级稀释至1.0ug/mL.
3.仪器
双道原子荧光光度计或同类仪器.
计算机系统及编码铅空心阴极灯.
电热板
分析步骤
4.试样消化
湿消解:称取固体试样0.20g~2.00g,液体试样2.00g(或mL)~10.00g(或mL),置于50mL~100m消化容器中(锥形瓶),然后加入硝酸+高氯酸(4+1)混合酸5mL~10mL摇匀浸泡,放置过夜.次日置于电热板上加热消解,至消化液呈淡黄色或无色(如消解过程色泽较深,稍冷补加少量硝酸,继续消解).稍冷加入20mL水再继续加热赶酸.至消解液0.5mL~1.0mL止,冷却后用少量水转入25ml容量瓶中,并加入盐酸(1+1)0.5ml,草酸溶液10g/l.5ml,摇匀,再加入铁氰化钾(100g/l)1.0ml,用水准确稀释定容至25ml.摇匀,放置30min后测定.同时做试剂空白.
标准系列制备:取25ml的容量瓶7支,依次准确加入铅标准应用液(1.00ug/ml)0.00`0.125`0.25`0.50`0.75`1.00`1.25ml(各自相当于铅浓度0.0`5.0`10.0`20.0`30.0`40.0`50.0ng/ml),用少量水稀释后,加入盐酸(1+1)0.5mL草酸(10g/l)0.5mL摇匀,再加入铁氰化钾(100g/l)1.0ml,用水准确稀释至刻度,摇匀,放置30min后待测.
5.结果计算
试样中铅含量按式(2)进行计算.
X=(c-c0)*V*1000/m*1000*1000````````````````````````(2)
式中:
X——试样中铅含量,单位为毫克每千克或毫克每升(mg/kg或mg/l)
C——试样消化液测定浓度,单位为纳克每毫升(ng/ml)
C0——试剂空白液测定浓度,单位为纳克每毫升(ng/ml)
M——试样质量或体积.单位为克或毫升(g或ml)
V——试样消化总体积,单位为毫升(ml)
计算结果保留三位有效数字.
5,海洋生物体中汞的测定——冷原子荧光法
1.范围及应用领域
本方法适用于海洋生物体中汞的测定.对含碘量高的海洋生物样品,应加入适量的硝酸银消除碘对测定的干扰.
2.方法原理
在硝酸——高氯酸体系中消化海洋生物样品,将生物体中汞全量转化为汞离子进入溶液.用硼氢化钾作为还原剂将溶液中的汞离子还原成单质汞,以氩气为载气使原子汞蒸汽进入原子荧光光度计的原子化器中,用特种汞空心阴极灯为激发光源,测定汞原子荧光强度.
3试剂
硝酸(优级纯),高氯酸(优级纯),盐酸(高纯),草酸溶液(1%):称取10g分析纯草酸(C2H2O4)溶解于100ml去离子水中.
4操作方法
称取2.0g样品放入三角瓶中,加入10ml硝酸,1ml高氯酸,盖上表面皿,放置过夜,次日将样品置于390摄氏度左右的电热板上加热,消化至黄棕色烟雾散尽,消化液清凉透明,近无色或淡黄色为止,取下冷却至室温,加入5ml盐酸,全部转移到100ml容量瓶中,用1%草酸溶液定容,混匀静置20min后上机测试,同时制备空白.
6,海洋生物中砷的测定——原子荧光法
1.方法原理:
生物样品经硝酸---高氯酸消解后,以硼氢化钾做还原剂将砷还原成挥发性氢化物,以氩气为载气使挥发性氢化物进入原子荧光光度计的原子化器中,进行原子荧光测定.
2.试剂
硝酸(有机纯),高氯酸(优级纯),
5%硫脲+3%抗坏血酸混合溶液:称取12.5g硫脲和70g抗坏血酸溶于250ml水中(使用前配制)
3.操作方法
称取2g样品于三角瓶中,加入10ml硝酸,盖上表面皿,摇匀后放置过夜,次日将样品置于电热板上,在400摄氏度内加热消化.消化至溶液近无色,消化时不能蒸干,再加入1高氯酸.加热消化至剩少量溶液,取下三角瓶,冷却用水定量移入100ml容量瓶中,加5ml硫脲+抗坏血酸还原剂,用水定容至100ml,充分摇匀后待.同时制备分析空白液.
7,甜蜜素的测定
1.样品处理:
称取固体样品5g于离心管中,加入2ml(1+1)硫酸溶液,5ml正己烷,ml1次氯酸钠(有效氯含量大于5%)剧烈混合,离心.取正己烷层移入另一只离心管中,加入10ml碳酸钠(5g/100ml)调至碱性,混合,离心,取正己烷层进样.
2.色谱条件:
检测器:紫外检测器
流动相:乙腈:水(70:30)或甲醇:水(80:20)
波长:314nm
流量:1ml/min
进样量:10ul
8,沙星类抗生素残留量——高效液相色谱法
1.样品处理
取样5.0g放入离心管中,取25ml乙腈及10ml无水硫酸钠,进行高速匀质,以3000转/分,离心5min,将上层溶液移入分液漏斗中,加入乙腈饱和正己烷溶液25ml,震荡,然后将乙腈层移入100ml磨口三角瓶中,将首次离心后残渣中再加入25ml乙腈,震荡30s,以3000转/分,离心3min,然后将上清液移入刚才分离后装有乙腈饱和正己烷的分液漏斗中,震荡5min,分离乙腈层,合并乙腈层于三角瓶中,加入正丙醇10ml,使用旋转蒸发器减压蒸干(水浴40摄氏度),残留物中加入乙腈:水(14:86)1,震荡30s,溶解.将内容物转入离心管中,加入乙腈饱和正己烷溶液,以3000转/分,除去正己烷层之后,取出乙腈——水层10ul作为HPLC和试样溶液.
2.色谱条件:
柱温:22摄氏度
流动相:乙腈,水+0.3%乙酸(14:86)
流速:1ml/min
检测器:紫外检测器
波长:270nm
出峰顺序:氟诺沙星,环丙杀星,恩诺杀星
9,防腐剂的处理方法
1.样品处理:
称取样品5g于100ml容量瓶中,加水定容至刻度,摇匀,静置,经滤膜过滤,进样.
2.色谱条件:C18柱
流动相:甲醇+乙酸铵溶液(0.02mol/L)(5:95)
流速:1.0ml/min
进样量:10ul
检测器:紫外检测器,波长230nm,灵敏度:0.2UFS
根据保留时间定性外标峰面积定量.
10,磺胺残留量检验方法
1.样品处理:
称取3g均匀试样,置于50ml离心管中,加入0.5ml10%硫酸钠水溶液和4.4ml乙腈—氯仿混合溶液(10+1).在涡流混匀器上混合成匀浆,以提取磺胺.其后,离心3min(3000r/min).用尖嘴吸液管将上清夜转入第二支离心管中,再用2ml乙腈—氯仿混合溶液(10+1)提取残渣,离心3min,提取液并入第二支离心管中,将该离心管置于气流加热快速浓缩装置中,小于40摄氏度蒸发至干.向残渣添加1ml2%硫酸钠水溶液和2ml正己烷,在涡流混匀器上剧烈混合,使残渣溶解,离心3min,用尖嘴吸液移去己烷层,并弃去,再用2ml正己烷洗水相一次,同法弃去己烷层,分别向水相中加入3ml和2ml乙腈—氯仿混合溶液(1+2),于涡流混合器上剧烈混合,离心3min,用尖嘴吸液管将下层有机相转入第三支离心管中,置于气流加热快速装置内,小于40摄氏度蒸发干,以流动相溶解残渣,并准确定容1ml,过滤.上清夜供LG测定
2.色谱条件:
柱温:22摄氏度
流动相:水+0.3%乙酸:乙腈(70:30)
流速:1
检测器:紫外检测器
波长:285
出峰顺序:磺胺嘧啶,磺胺二甲嘧啶,磺胺甲氧嘧啶,磺胺间甲氧嘧啶,磺胺喹恶啉
十一,SO2的测定GB/T5009.34---1996
1.原理
亚硫酸盐与四氯汞钠的反应生成稳定的络合物,再与甲醛及盐酸副玫瑰苯胺作用生成紫红色络合物,与标准系列比较定量,本方法最低检出浓度为1
2.试剂:
1,四氯汞钠吸收液:称取13.6g氯化高汞及6.0gNaCL,2,溶于水中并稀释至100ml,3,放置过夜,4,过滤后备5,用
6,亚铁氰化钾溶液:称取10.6g亚铁氰化钾,7,加水并稀释至100ml
8,甲醛溶液(2):吸取0.55ml甲醛(36%),9,加水稀释至100ml,10,混匀
11,乙酸锌12,溶液:称取22g乙酸锌13,溶于少量水中,14,加入3g冰乙酸,15,加水稀释至100ml
16,盐酸副玫瑰苯胺溶液:称取0.1g副玫瑰苯胺于研钵中,17,加少量水研磨使溶解并稀释至10ml0.取出20ml,18,置于100ml容量瓶中,19,加入盐酸(1+1),20,充分摇匀后使溶液由红变黄,21,如不22,变黄再滴加少量盐酸至出现黄色,23,再加水稀释至刻度,24,混匀备25,用.
3.样品测定:
称取固体样品5—10g研磨均匀的样品,用少量水湿润并移入100ml容量瓶中,然后加入20ml四氯汞钠吸收液,浸泡4小时以上,再加入亚铁氰化钾溶液及乙酸锌溶液各2.5ml,最后用水稀释至100ml刻度,过滤备用
吸取10ml样品处理于50ml比色管中.
另吸取0,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0,1.5,2.0mlSO2标准使用液,分别置于50ml比色管中.
于样品及标准品中各加入四氯汞钠吸收液至10ml,然后加入1ml氨基磺酸钠溶液,1ml甲醛溶液及1ml盐酸副玫瑰苯胺溶液,摇匀,放置20min,于550nm处测定吸光度,绘制标准曲线比较.
十二,火腿及其它肉制品中亚硝酸盐的测定
1.样品处理:
取1g样品加入2.5ml硼砂,用70°C的水烧杯内的物质转移到100ml容量瓶中,煮沸15min,放冷,加2.5ml乙酸锌和2.5ml亚铁氯化钾,定容,放置30min,过滤.
2.测定:
吸取10ml滤液于50ml比色管,加入2ml对氨基苯磺酸溶液,混匀,置5min,加入1ml盐酸萘乙二胺溶液,置5min于540nm处测定.
3.试剂:
硼砂饱和液:50g硼砂放入500ml热水中.
4g/l对氨基苯磺酸:称取0.4g对氨基苯磺酸溶于100ml水中,避光保存.
亚铁氰化钾:10.6g亚铁氰化钾于100ml水中.
乙酸锌:称22g乙酸锌于少量水中,加冰乙酸3ml,稀释至100ml.
十三,氯霉素的测定
1.原理:
ELISA基础是抗原抗体反应.抗体被包被在微孔板的小孔中,含有抗原的样品或标准品与抗原酶标记物被加入到小孔中,游离的抗原与抗原酶标记物竞争抗体结合位点,没有结合的抗原酶标记物在清洗步骤中被除去,加入底物和显色剂培养.结合的抗原酶标记物将无色的发色剂转化为有色物质,然后加入终止液(终止液可能会使刚生成的有色物质转化成其他颜色的物质)最后测定吸光度,吸光度值与样品中的抗原浓度成正比.
检测范围:肉类,水产类,牛奶,蜂蜜,血清,尿样
2.设备:
均质器,离心机,恒温水浴箱,旋转蒸发器,混合器,酶标仪,离心管,刻度移液管,加样器
3.试剂:
乙酸乙酯,正己烷
4.样品前处理
(1)肉类,水产类前处理:
取3g切碎的样品置于离心管中,加入6ml乙酸乙酯均质,以3000r/min离心10min,取2ml上清夜置于另一支离心管中,在旋转蒸发器上蒸干.在此离心管中加入2ml正己烷,震荡混合,再加入1ml无色抽取试样稀释液,震荡混合约10s,以离心机3000r/min10min,利用吸管吸去中间乳化层部分的上清夜(正己烷层),取100ul待测.用氯霉素酵素免疫检验试剂套组检测检体中所含的CAP浓度
(2)蜂蜜的前处理:
取蜂蜜2g,置于小离心管中加入4ml水溶液,加入2ml乙酸乙酯后,震荡摇匀然后3000r/min离心10min,取上清夜0.5ml置于萃取管中于水浴60摄氏度下蒸干,加入0.5ml无色抽取试样稀释液混合后,震荡约10s取100ul待测.用氯霉素酵素免疫检验试剂套组检测检体中所含的CAP浓度
(3)牛奶前处理:
取牛奶0.2ml,加入红色生乳稀释液0.8ml,振荡混合(1:4倍稀释),用氯霉素酵素免疫检验试剂套组检测检体中所含的CAP浓度.
十四,检验结果报告单
实习总结
我从4月21号到6月12号在威海xx-x集团实习.期间从4月21号到5月29号先被分到集团中心化验室.5月30号到6月12号在xx-x大学生创业园实习.
刚到公司的时候不熟悉情况,主任没有给我们安排具体工作,只是在微生物的培养室帮忙,第一天我就炖坏了培养基烧瓶,以后我细心观察,自己动手操作配制,从剪样,均质,稀释,倒皿到培养,划线,计数每个步骤都认真学习,从开始的陌生到后来的一一熟练,最终可以自己独立娴熟的操作.通过这十天的学习,才发现我们在学校学到的只是一些比较单纯的理论知识,缺乏实践因而也就对所学的知识缺乏深刻全面的理解,难以举一反三,限制拓宽自己的知识面.
5月1日,我从生化区调往理化区.跟着烟大毕业的一位同事做食品中的SO2,亚硝酸盐,盐分,水分,消毒水中的有效氯,游离碱等等,工作比较繁忙,但从中学到了很多的东西.理化实验对计量的严格要求,以及对国标行标的频繁接触让我对理化检验和色谱前处理都有了更深的认识.有机氯,有机磷,抗生素,甜蜜素和防腐剂的检测让我对色谱操作有了简单了解.另外,对一些理化分析常用仪器的操作(如旋转蒸发仪,震荡仪,酶标仪,离心机,分光光度计等等)也慢慢熟练.经过半个多月的学习,我基本已经能独立完成非色谱检测的所有实验和色谱检测的所有前处理工作.在学校里,我觉得自己总有眼高手低的缺点,认为自己的知识已经达到一定的水平,能力也不底.而通过实践才发现自己的知识在很多方面存在漏洞.以后的日子我把自己当作一个刚刚进入食品行业的新员工,把工作岗位当作新的起点,脚踏实地,虚心请教每一位同事,努力完善自己的专业知识.
5月29日,我被分到大学生创业园工作,因为公司尚未正式成立,所以所做的工作都比较初级.前几天清理机器打扫卫生,接着是更换罐装燃气,运作主体烤箱试生产,卸面粉,鲜虾饼,鱿鱼,扇贝等原材料,最后是实验性生产和包装.短短十几天的车间工作,对我却是莫大的考验,莱农艰苦奋斗的精神一直给我鼓舞.虽然挺苦挺累,但最终挺了过来,并掌握了整套生产工艺.以上的经历让我认识到与人沟通的重要性和诚信在社会生活工作中的巨大作用,也对艰苦奋斗的精神有了进一步的理解.以后我将把它们为我工作中的路标.在实践中使自己的技能不断的丰富积累,再联系在学校学到的知识,使之融会贯通,在此基础上自己才有可能提高分析问题解决问题和独立工作的能力.
通过近两个月的实习使我有机会将在学校学习的理论知识应用于实践,丰富了理论知识也提高了实际工作能力,同时在踏入社会的过程中学会了怎样与人诚信相处,怎样与人交流沟通,为以后踏上社会奠定了基础,有利于以后的工作和学习.
